AlexaFluor647 Azide，AF 647 Azide，别名AF647‑N3、Alexa Fluor 647叠氮，是远红光波段带叠氮反应基团的荧光探针，发色团为Alexa Fluor647，末端共价连接叠氮官能团，外观深蓝色固体，激发波长651nm，发射波长672nm，摩尔消光系数252000 L·mol⁻¹·cm⁻¹，量子产率0.33，水溶性良好，可溶于水、DMSO、DMF多种溶剂，pH4‑10区间荧光性能基本不受pH扰动。

分子的核心功能来自叠氮基团的生物正交反应活性，叠氮基团可以和炔基发生铜催化叠氮‑炔环加成CuAAC点击化学反应，在铜离子催化条件下，与丙炔、己炔修饰的分子高效生成稳定三氮唑五元环，实现荧光基团共价标记目标底物；针对铜离子敏感体系，也可搭配环张力炔DBCO修饰底物，实现无铜SPAAC反应，规避铜离子带来的氧化损伤问题。远红光波段优势显著，长波长激发发射，降低介质自发荧光背景，减少紫外、短波长可见光带来的光损伤，适合复杂混合体系荧光示踪。

该探针广泛用于炔基修饰高分子、多糖、多肽、人工合成分子的荧光标记，先将底物引入炔基标记，再投入AF647 Azide探针，通过点击反应带上远红荧光标签。标记完成之后，可借助荧光光谱、荧光凝胶、荧光分光设备开展表征分析。该染料荧光亮度高，光漂白抗性优异，相比于Cy5类叠氮探针，抗环境干扰能力更强，适合低丰度底物的荧光示踪检测。

储存条件为‑20℃避光干燥密封，固体避光保存，母液配置建议用无水DMSO配制，分装冻存，避免反复冻融，水溶液储存时间不宜过长。叠氮基团化学稳定性较好，但需要避免强还原剂，还原剂会破坏叠氮基团，丧失点击反应活性。实验中需要根据底物炔基摩尔量调整探针投料比例，反应结束后，可通过透析、凝胶过滤除去未反应游离AF647‑Azide，降低游离染料造成的背景信号。该探针是远红光窗口生物正交标记体系中十分经典的荧光报告分子，为高分子、合成生物分子的荧光示踪提供可靠工具。

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