Alexa荧光素555蛋白盒，英文全称Alexa Fluor 555 Protein Labeling Kit，别名AF555 Conjugation Kit、Alexa Fluor 555 Conjugation Kit，是一套完整用于将Alexa Fluor 555荧光染料共价修饰各类蛋白、多肽的成套试剂组合，整套体系包含NHS活化型Alexa Fluor 555荧光染料粉末、缓冲盐、脱盐纯化树脂、离心纯化柱等全套组件，无需额外购置复杂试剂，即可完成蛋白荧光标记实验。Alexa Fluor555染料激发波长553nm，发射波长568nm，光谱和Cy3高度兼容，普通Cy3滤镜组可直接使用，光稳定性优于传统TRITC、TAMRA染料，高标记密度下自猝灭效应弱，荧光信号稳定。

试剂盒的反应原理依托NHS酯与蛋白分子表面赖氨酸残基的伯氨基发生亲核取代，形成稳定酰胺共价键，将荧光发色团牢固接枝到蛋白分子上，标记反应在弱碱性碳酸氢盐缓冲环境下进行，室温避光孵育即可完成偶联，无需高温、重金属催化，对多数蛋白天然构象扰动小。试剂盒内置的尺寸排阻纯化树脂，用于去除未反应游离染料、小分子副产物，一步分离标记完成的荧光蛋白，降低游离染料带来的背景荧光干扰，提升后续检测信噪比。

该试剂盒可适配抗体、酶、重组蛋白、多肽等多种蛋白底物，只需要蛋白分子表面存在游离赖氨酸残基即可标记。实验过程中染料与蛋白摩尔投料比是关键参数，不同蛋白*优摩尔比存在差异，抗体类样品常用10‑20倍摩尔染料投入，小分子多肽需要进一步优化配比，标记比值过高会造成蛋白变性，比值过低会导致荧光亮度不足。标记完成产物需要避光保存，避免强光照射，防止荧光基团光漂白。

该荧光标记体系多用于荧光光谱测试、凝胶荧光成像、固相生物芯片探针制备等方向，不依赖细胞体系，可大量完成体外蛋白荧光偶联，相比于直接购买商品化荧光标记蛋白，试剂盒可以自主调控标记度，适配特殊蛋白样本。整套试剂需要‑20℃避光干燥储存，染料组分对水汽敏感，包装回温干燥后再开启，防止NHS酯水解失活，水解后的染料丧失蛋白偶联活性。

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