Dibenzocyclooctyne-PEG-NHS，二苯并环辛烯-聚乙二醇-活性酯，也被称为DBCO-PEG-Succinimidyl Ester、DBCO-PEG-活性酯，是无铜点击化学领域应用最广泛的双功能正交偶联试剂之一，它将两个互不干扰的正交反应基团整合在同一个分子中，让研究者可以通过两步互不交叉的反应，轻松实现两种不同生物分子之间的定点共价连接，彻底解决了传统双功能交联剂反应基团相互干扰的难题。

该化合物的两端分别拥有完全独立的正交反应活性：一端是N-羟基琥珀酰亚胺活性酯基团，在弱碱性的生理pH条件下，能高选择性地与伯氨基发生反应，形成稳定的酰胺键，可用于标记蛋白表面的赖氨酸残基、氨基修饰的寡核苷酸、氨基化的纳米材料等各类含氨基的底物；另一端是二苯并环辛烯基团，可在无铜、无催化剂的温和条件下，与叠氮基团发生快速的SPAAC环加成反应，整个过程不会与活性酯或氨基基团发生任何交叉反应，完全实现两步反应的正交独立。

中间的聚乙二醇连接链是这款试剂的关键设计亮点，它不仅大幅提升了整个分子的水相溶解性，让原本疏水的DBCO基团可以直接在水相体系中完成标记反应，避免了大量有机溶剂对生物分子活性的破坏，还能在两个被偶联的分子之间提供足够的柔性间隔，消除不同大分子之间的空间位阻影响，让两端的反应基团都能充分接触各自的靶标分子，大幅提升偶联反应的整体效率。同时聚乙二醇链的长度可以根据需求灵活调整，从短链的PEG4到长链的PEG20都有成熟的产品规格，适配不同距离需求的偶联场景。

目前二苯并环辛烯-聚乙二醇-活性酯已经成为生物偶联实验中的核心基础试剂：它可以先对蛋白进行DBCO基团的定点修饰，再与叠氮修饰的核酸、荧光染料、多糖等分子偶联，制备出性能均一的蛋白-核酸偶联物、蛋白-荧光探针等功能生物分子；在纳米材料修饰领域，它可以对氨基化的脂质体、纳米微球表面进行改性，引入DBCO反应位点，后续通过点击化学反应高效固定叠氮修饰的靶向分子，制备出分散性好、靶向效率高的功能纳米材料，是当前生物探针、生物材料研发中不可或缺的核心工具试剂。

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