DBCO-S-S-MAL，二苯并环辛炔 - 二硫键 - 马来酰亚胺是应用广泛的还原响应型异双功能交联试剂。分子两端分别为马来酰亚胺（MAL）与 DBCO 环辛炔，中间依靠二硫键（S-S）充当可裂解连接臂，融合巯基特异性偶联反应以及无铜点击化学反应，能够分步将两种不同底物共价相连，同时赋予交联产物还原刺激响应特性。马来酰亚胺在 pH 6.0~7.5 缓冲环境下，特异性与游离巯基发生加成反应，高效标记带有半胱氨酸的多肽、蛋白；DBCO 基团可在常温纯水环境和叠氮基团发生环加成，全程无需铜催化剂，避免金属离子造成的氧化破坏。两个活性基团反应体系相互独立，可分先后完成两步偶联，减少同源分子自聚副反应。

中间二硫键是该试剂核心特征。生理相关浓度的还原硫醇存在时，二硫键发生断裂，让原本相连的两个底物相互分离。依靠这一特性，能够构建结构可逆的共轭复合物，实现分子组分可控解离。对比不含裂解臂的交联剂，该分子适合需要后续可控解除共价连接的实验体系。实际操作具备规范流程：优先完成巯基底物与 MAL 的偶联，充分清除未反应试剂之后，再加入叠氮修饰化合物，和 DBCO 发生点击反应。试剂储存需要隔绝湿气与还原剂，长期接触 DTT、β- 巯基乙醇等物质会造成连接臂提前断裂，丧失交联能力。

该交联砌块大量用于构建刺激响应型二元生物共轭物、纳米颗粒表面分步修饰。可将巯基蛋白与叠氮改性高分子进行桥接，制备还原敏感型组装材料；也可用于固相界面的双层分子构建，在还原刺激下调控表层分子脱除。凭借成熟稳定的合成路线、温和的反应条件，成为动态共价修饰领域最常用的双功能交联试剂之一，为可解离生物偶联体系提供标准化化学工具。

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