Cy5、DiO胶乳示踪不清？西安瑞禧生物提供双荧光标记定制

一、Cy5、DiO胶乳示踪不清怎么办？

天然胶乳颗粒使用Cy5和DiO进行双荧光示踪时，若出现荧光信号弱、颗粒边界模糊或双通道共定位不明显，应优先检查染料标记效率、游离染料残留、颗粒分散状态及荧光通道串扰。天然胶乳颗粒由疏水性聚异戊二烯核心及蛋白质、磷脂表面层组成，采用不同荧光染料分别标记表面组分，有助于分析颗粒界面结构。

针对蛋白质组分，可选择Cy5-NHS等活性染料与可反应氨基进行偶联；DiO则属于亲脂性荧光染料，可用于脂质组分示踪。实验中应分别进行单染料标记，优化染料用量、反应时间和纯化条件，去除游离染料后再开展双通道成像。

成像时可参考Cy5约649 nm激发、670 nm发射及DiO约484 nm激发、501 nm发射的光谱特征，设置独立检测通道，并采用顺序扫描降低串色。对于纳米尺度胶乳颗粒，还可结合双色随机光学重建显微镜（STORM）和冷冻透射电子显微镜（cryo-TEM）观察。通过Pearson相关系数、荧光定位点分布及颗粒形貌分析，提高表面蛋白质与磷脂空间分布判断的可靠性。

二、西安瑞禧生物提供Cy5、DiO双荧光标记定制

西安瑞禧生物可提供Cy5、Cy5-NHS、Cy5-MAL、DiO等荧光染料，并支持天然胶乳颗粒、聚合物纳米颗粒及脂质纳米载体双荧光标记定制。

针对天然胶乳颗粒表面蛋白质和磷脂的差异化示踪需求，西安瑞禧生物可根据目标组分的化学性质选择适宜的荧光染料及连接方式，提供Cy5活性基团修饰、蛋白质荧光偶联、DiO脂质组分标记及双通道荧光组合方案。

相关定制内容还包括荧光染料官能团设计、标记条件调整、游离染料去除、荧光光谱检测和功能化颗粒制备，可为胶乳颗粒表面组分分析、双荧光共定位和超分辨成像研究提供科研材料支持。

三、真实科研文献：Cy5、DiO双荧光示踪用于天然胶乳颗粒结构研究

2022年发表于Industrial Crops and Products的研究《In-situ observation of spatial organization of natural rubber latex particles and exploring the relationship between particle size and mechanical properties of natural rubber》，使用了西安瑞禧生物提供的Cy5和DiO荧光染料，结合cryo-TEM与双色STORM技术研究天然橡胶胶乳颗粒的表面空间组织。

研究首先利用cryo-TEM观察未经干燥或化学固定的天然胶乳颗粒，发现颗粒整体呈球形，平均粒径为88±15 nm。随后利用STORM技术区分颗粒表面的蛋白质与磷脂组分，发现二者共同形成混合单分子层，平均厚度约为4.6±0.77 nm，为天然胶乳颗粒界面结构模型提供了实验依据。

研究还比较了不同粒径天然橡胶颗粒的分子结构与力学性能。小颗粒组粒径约106 nm，大颗粒组约628 nm。硫化后，小颗粒组拉伸强度达到24.6 MPa，而大颗粒组为5.7 MPa，提升约4.3倍；韧性由12.9 kJ/m²提高至44.9 kJ/m²，提升约3.5倍。

上述结果表明，天然胶乳颗粒的表面空间组织和颗粒尺寸与橡胶材料的最终性能密切相关。双色荧光超分辨成像能够更清晰地观察颗粒表面组分，为天然高分子材料的界面结构分析提供有效方法。

四、西安瑞禧生物Cy5、DiO产品及荧光示踪定制能力

西安瑞禧生物可提供Cy5系列花菁染料、DiO亲脂性荧光探针及其他功能化荧光标记材料，支持蛋白质、脂质膜、聚合物及纳米颗粒的荧光功能化修饰。

其中，Cy5-NHS适用于含有可反应氨基的蛋白质标记体系，Cy5-MAL适用于巯基偶联，DiO可用于脂质膜及疏水界面示踪。针对不同样品，可通过调整染料结构、标记用量及纯化方式，改善荧光信号强度与标记均一性。

对于天然胶乳颗粒双标记信号弱、背景荧光较高、不同通道信号不均衡及共定位分析困难等科研需求，西安瑞禧生物可提供Cy5、DiO功能化染料及双荧光示踪材料定制，并结合荧光光谱检测和纳米颗粒表征，为天然橡胶、功能高分子和纳米界面材料研究提供材料支持。

五、参考文献

Wei Y C, Zhu D, Xie W Y, et al. In-situ observation of spatial organization of natural rubber latex particles and exploring the relationship between particle size and mechanical properties of natural rubber. Industrial Crops and Products, 2022, 180: 114737.

DOI：https://doi.org/10.1016/j.indcrop.2022.114737

论文原文：https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0926669022002205