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Cyanine3-Glu(Cy3葡萄糖)是Cy3三甲川花菁荧光发色团与葡萄糖共价偶联得到的荧光标记六碳单糖分子。葡萄糖属于吡喃型六碳醛糖,环上分布多个羟基,可在体系内形成丰富的氢键网络,分子空间构型稳定;Cy3为可见光波段花菁染料,具备高摩尔消光系数,荧光信号响应微环境极性变化,偶联之后葡萄糖吡喃环结构完整保留,羟基氢键位点不受破坏,同时赋予分子可见光荧光示踪能力。
葡萄糖吡喃环上羟基的空间排布具有高度规律性,可与高分子链上羰基、羟基等极性基团形成多点协同氢键,诱导高分子链段发生构象变化。与麦芽糖、棉子糖这类寡糖不同,葡萄糖为单糖,分子尺寸更小,氢键位点更集中,扩散速率更快。Cy3发色团对局部微环境极性敏感,当葡萄糖分子与高分子链形成氢键复合物,分子周围介质极性降低,荧光寿命与荧光强度随之改变,可反馈分子所处微环境信息。
该分子适用于多糖高分子链段构象调控、单糖诱导高分子组装、水相糖-高分子氢键网络动力学研究。在水溶性多糖高分子溶液体系中,加入Cy3-Glu,利用稳态荧光光谱监测荧光参数变化,研究葡萄糖分子通过多点氢键诱导高分子链舒展或者蜷缩的构象转变过程,测定构象转变对应的临界糖浓度。借助荧光相关光谱,检测糖-高分子复合物流体力学半径变化,区分游离葡萄糖分子和与高分子结合的复合物。
Cy3可见光荧光信号背景干扰低,不需要近红外专用设备。分子水溶性优异,可直接溶于纯水及各类中性缓冲溶液,不会造成高分子组装体系解体。通过改变体系温度,可以探究氢键作用的温度依赖性,获取糖-高分子相互作用的热力学参数。利用荧光共振能量转移体系,将Cy3-Glu作为供体,搭配合适受体染料,测量糖分子与高分子链之间的分子间距,解析氢键复合物空间结构。
Cy3具备良好抗光漂白性能,可开展长时间动力学观测,追踪缓慢的高分子构象演变过程。改变体系内离子浓度,研究离子对糖-高分子氢键网络的破坏效应。Cy3-Glu整合葡萄糖多点氢键作用与Cy3荧光读出能力,无需额外标记,为单糖诱导高分子构象变化、水相糖-高分子氢键组装、单糖分子溶液扩散行为研究,提供可见光单糖示踪分子,适配荧光光谱仪、荧光相关光谱、共聚焦荧光成像设备。

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