Janelia Fluor 549, NHS ester，JF549活性酯，英文别名JF549-NHS、Janelia Fluor 549 succinimidyl ester，是一类具有高亮度、低光漂白特性的近红橙色荧光染料活性酯衍生物，NHS琥珀酰亚胺酯作为活化官能团，可与伯氨基发生酰胺化共价偶联，将JF549荧光发色团稳定引入氨基功能化底物，适合长时间荧光成像与定量检测体系。该染料固体为紫红色粉末，易溶于DMSO、DMF等非水极性溶剂，水溶液中易水解，现配现用，全程避光低温储存，防止染料光降解与活性酯水解失活。

从光学骨架分析，JF系列染料经过结构优化，对比传统罗丹明类染料，分子骨架经过改造，大幅抑制荧光聚集淬灭效应，在较高标记密度下依然维持较高荧光量子产率。该染料*大激发波长约549 nm，*大发射波长约571 nm，光谱区间远离FITC等绿色荧光基团，可用于多通道荧光并行检测，实现多组分信号区分。同时该染料光稳定性优异，在持续激发光照射下，荧光衰减速率远低于传统荧光染料，适合长时间动态观测，捕捉缓慢变化的动态过程。NHS活性酯基团作为偶联位点，在弱碱性缓冲环境下可与伯氨基高效反应，形成稳定酰胺键，完成标记；在水环境中活性酯会缓慢水解，因此需要控制反应时长，减少水解带来的染料损耗。

该染料核心应用集中在多色荧光标记与长时间动态成像表征。在高分子微球、多孔载体表面标记实验中，JF549-NHS用于标记表面氨基位点，通过荧光强度定量评估基材氨基接枝密度，和其他通道荧光染料搭配，实现双标记共定位表征。在分子互作动力学研究中，利用其高光稳定性，长时间追踪标记分子的扩散、结合与解离过程，采集连续时序荧光信号，拟合动态参数。在二维材料界面表征方向，将染料偶联至氨基修饰薄膜，借助荧光成像观测界面分子分布、相分离现象，解析界面分子排布特征。

偶联反应条件需要精细调控。反应体系pH维持在弱碱性区间，可提升酰胺化偶联效率；pH过高会加速NHS酯水解，pH过低则氨基质子化，降低反应活性。标记投料比需要合理控制，染料投料过高会造成染料堆叠，引发聚集淬灭，降低检测信噪比；投料不足则标记率偏低，信号微弱。标记完成后，需通过透析、凝胶过滤去除未反应游离染料，消除游离染料背景干扰。

相较于传统罗丹明染料，JF549水溶性更好，非特异性吸附更低，标记后背景荧光弱。其光谱位置适配主流共聚焦、宽场荧光设备，无需特殊检测器。该染料为多组分并行检测体系提供可靠的橙色荧光通道，为界面表征、分子示踪、多色标记方法学搭建提供高性能荧光标记砌块。

关于我们：
西安瑞禧生物科技有限公司经营的产品种类包括有：近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯，二氧化硅及介孔二影产品，荧光蛋白及荧光探针等，欢迎咨询。

相关推荐：

1. JF503-NHS，Janelia Fluor 503活性酯

2. JF646-NHS，Janelia Fluor 646活性酯

3. AF546-NHS，Alexa Fluor 546活性酯

4. TMR-NHS，四甲基罗丹明活性酯

5. JF549-Maleimide，Janelia Fluor 549马来酰亚胺

6. JF549-Azide，Janelia Fluor 549叠氮

7. Rhodamine Red-NHS，罗丹明红活性酯

8. JF549-Alkyne，Janelia Fluor 549炔基