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FAM-C3-Thiol是一款末端带有游离巯基的绿色荧光衍生试剂,分子结构中5-羧基荧光素通过一个三碳烷基连接臂与末端巯基共价相连,是专门针对巯基-双键点击反应、二硫键交换反应设计的小分子荧光标记砌块。不同于常规的氨基类FAM试剂,巯基端的引入让该分子可以通过更多样的化学反应类型实现偶联,适配更多特殊的标记场景,是构建复杂荧光功能分子的重要基础原料。
从分子设计的优势来看,三碳烷基作为间隔臂完全隔绝了极性的FAM荧光团与末端巯基,大幅降低了巯基被氧化形成二硫键的概率,相较于直接将巯基修饰在荧光素母核上的产品,该试剂的储存稳定性大幅提升,在常规惰性气体保护条件下可长期存放,不会出现明显的二聚失活现象。5-位取代的FAM结构拥有高量子产率的绿色荧光信号,在中性环境中荧光强度稳定,光漂白抗性优于很多新型荧光染料,长时间的激光照射下依然能保持稳定的信号输出,适配长时间成像的实验需求。
在理化性质层面,该化合物的外观为亮黄色固体粉末,可完全溶解在DMSO、DMF等无水有机溶剂中,在无氧的中性缓冲液中也可实现良好分散。其激发波长492nm,发射波长517nm,摩尔消光系数高,即使在纳摩尔级别浓度下也能被荧光检测仪清晰捕捉。由于巯基易被氧化,储存时需要严格除氧密封,放置于-20℃避光环境中,取用过程中避免长时间暴露在空气中,防止巯基氧化失活。产品经HPLC纯化后纯度可达95%以上,巯基活性可通过Ellman试剂定量标定,确保后续偶联反应的效率。
在实际科研场景中,FAM-C3-Thiol可用于构建荧光标记的金纳米颗粒探针,利用巯基与金原子之间的强Au-S相互作用,将FAM荧光团定向修饰在金纳米颗粒的表面,通过调控接枝密度制备出具有不同荧光淬灭效率的金纳米荧光复合体系,用于构建高灵敏度的荧光“开-关”型生物传感器。也可用于马来酰亚胺修饰的功能分子的荧光标记,通过巯基与马来酰亚胺的迈克尔加成反应,将FAM荧光团精准接入目标分子,反应条件温和,副反应*少,用于研究功能分子在多孔水凝胶内部的扩散与分布规律。此外它还可作为自由基引发的巯基-烯点击反应的荧光单体,在光聚合制备荧光功能水凝胶的过程中作为共聚单体直接接入凝胶网络,一步反应即可制备出自带均匀绿色荧光信号的功能水凝胶材料。

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