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Alexa Fluor660 Bovine Serum Albumin,Alexa Fluor660牛血清白蛋白,别名AF660‑BSA、BSA‑AF660,是Alexa Fluor660荧光染料共价偶联牛血清白蛋白得到的荧光蛋白偶联物。Alexa Fluor660属于中长波红光荧光染料,激发663 nm,发射690 nm,光谱位置介于AF647与AF700两者之间,填补二者之间的光谱通道,染料水溶性良好,光稳定性优秀;牛血清白蛋白作为标准模式蛋白,分子内存在多个色氨酸残基,同时表面分布丰富赖氨酸残基可供染料共价接枝。
在偶联制备环节,染料NHS活性酯与BSA表面伯氨基发生酰胺化反应,反应完成后必须去除游离染料。如果游离染料残留,会在体系中自由扩散,无法代表蛋白本身的行为,直接造成定量结果失真。标记度是该探针的关键参数,标记度偏低荧光信号不足;标记度过高,外来荧光基团会干扰BSA内部疏水口袋结构,改变蛋白本身与小分子的结合特性,所以制备时需要控制投料比,得到标记度适中的产物。
该探针主要用于体外蛋白分配行为、高分子介质相互作用的研究。AF660独特的光谱窗口,可以和AF488、AF555、AF700等多种荧光探针组成多色检测体系,实现多种模式蛋白并行检测。可用来研究水凝胶内部的蛋白扩散行为,观测球状蛋白在三维多孔高分子网络当中的渗透、滞留情况;也可以用于纳米颗粒表面蛋白吸附的定量表征,借助荧光信号,分析不同环境条件对蛋白‑颗粒相互作用带来的影响。
储存条件‑20 ℃避光密封保存,蛋白水溶液分装冻存,规避反复冻融引发蛋白聚集。实验缓冲液选用中性pH,避免强酸碱;操作避光,减少光漂白。该中长波荧光标记BSA,拓展模式蛋白探针的光谱选择,为多通道并行的体外蛋白‑材料互作实验提供可靠工具。

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