AlexaFluor 546 NHS ester，Alexa Fluor 546琥珀酰亚胺活性酯，别名AF546‑NHS、Alexa Fluor546 SE，属于氨基反应型磺化荧光染料，分子由带负电磺酸基团的Alexa Fluor546荧光母核与琥珀酰亚胺活性酯（NHS ester）官能团共价结合而成。该染料激发波长556 nm，发射波长573 nm，摩尔消光系数高，水溶性优异，磺酸基团*大改善染料在水相体系的溶解能力，规避普通疏水荧光染料易发生团聚沉淀的问题，可直接在含水缓冲介质中开展标记操作。NHS活性酯是针对伯氨基的高活性反应基团，可与蛋白、多肽、氨基修饰多糖、氨基改性高分子微球表面的游离伯氨基发生酰胺化偶联，形成化学稳定性*强的共价荧光标记产物。

该染料与传统TRITC相比，光稳定性得到明显提升，在长时间光照条件下光漂白速率更低，标记后不易出现荧光信号快速衰减的现象，染料光谱通道处于橙红波段，和常见荧光基团光谱区分度良好，适合多色荧光组合体系。反应对环境pH较为敏感，*优反应区间为pH 8.0‑8.5弱碱性缓冲体系，酸性条件下NHS酯水解速率会显著加快，直接降低标记效率。染料固体状态对水汽十分敏感，遇水会快速水解生成无偶联活性的羧酸衍生物，因此储存、称量操作都需要在干燥环境完成。

该试剂的一大应用方向为体外高分子与生物大分子的荧光修饰，除各类球状蛋白之外，还可对氨基化琼脂糖微球、氨基改性纳米颗粒进行荧光修饰，为固相颗粒引入橙红色荧光标签，便于使用荧光分光光度计、荧光凝胶成像、流式检测设备完成颗粒示踪与定量分析。染料投料摩尔比需要合理调控，过高染料比例会造成大分子内部疏水堆叠，引发荧光自猝灭，造成实际荧光强度下降；比例过低则标记度不足，信号微弱。标记完成后，需要借助透析、尺寸排阻色谱去除未反应游离染料，消除游离染料带来的背景干扰。

合成制备上，一般先合成带有磺酸取代的荧光母核羧酸中间体，再与N‑羟基琥珀酰亚胺经过缩合反应得到NHS活性酯产物，经过反相色谱纯化，获得高纯度染料。产物固体需‑20 ℃避光真空干燥保存，母液建议使用无水DMSO进行配制，分装保存，避免反复冻融。该氨基反应型橙红荧光染料，为多色标记方案提供可靠的橙红通道标记工具。

关于我们：
西安瑞禧生物科技有限公司经营的产品种类包括有：近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯，二氧化硅及介孔二影产品，荧光蛋白及荧光探针等，欢迎咨询。

相关推荐：

1. AF546‑Azide，Alexa Fluor546叠氮

2. AF546‑Maleimide，Alexa Fluor546马来酰亚胺

3. AF546‑Hydrazide，Alexa Fluor546酰肼

4. AF546‑Alkyne，Alexa Fluor546炔基

5. AF555‑NHS ester，Alexa Fluor555琥珀酰亚胺活性酯

6. TAMRA‑NHS ester，TAMRA琥珀酰亚胺活性酯

7. iFluor546‑NHS ester，iFluor546琥珀酰亚胺活性酯

8. Sulfo‑Rhodamine‑NHS ester，磺化罗丹明琥珀酰亚胺活性酯

9. AF532‑NHS ester，Alexa Fluor532琥珀酰亚胺活性酯