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Me-tetrazine-Cy5是一类在Cy5花青素共轭体系上连接甲基四嗪功能端的双功能荧光试剂。它不是简单的Cy5染料与四嗪混合物,而是通过稳定连接臂将两个功能模块固定在同一分子中。Cy5承担远红光信号输出,Me-tetrazine则提供可与TCO张力烯烃进行快速环加成的反应入口。因此,该产品可以直接作为“带点击端的Cy5”使用,减少传统荧光染料在材料标记前需要额外活化的步骤。
Cy5骨架通常具有较长的多甲川链。随着π共轭范围增加,其能级结构与短波花青素有所区别,因此能够在较长可见光波段产生吸收和发射。Cy5结构对周围微环境较为敏感,溶剂极性、离子浓度、芳香聚集状态和连接体均可能影响最终光谱,因此在制成不同Cy5偶联物后,实际光谱参数应重新确认。
Me-tetrazine中的四嗪环富含氮原子,电子密度较低,因此能够与富电子张力烯烃快速发生逆电子需求Diels-Alder反应。TCO是最典型的反应对象之一。与传统先将羧基活化再连接胺的方法相比,Tetrazine/TCO反应具有不同的官能团识别模式,因此特别适合在已经含有NH2、COOH、OH等结构的材料上进行第二阶段标记。
Me-tetrazine-Cy5-Maleimide与巯基微球连接,可获得TCO功能表面;之后加入Me-tetrazine-Cy5,即可利用四嗪端完成远红荧光化。这样一来,第一步利用SH/MAL反应,第二步利用TCO/Tetrazine反应,两步使用不同化学机制,更容易实现有序的表面结构构建。
在高分子体系中,Me-tetrazine-Cy5可用于标记TCO-PEG、TCO-Dextran、TCO-PVA衍生物或其他TCO修饰材料。如果TCO位点数量已知,还可以通过控制Me-tetrazine-Cy5的投料量调节平均标记率。相比直接用Cy5-NHS随机消耗高分子上的多个氨基,这种方式更方便保留材料原有功能基团。
对于脂质颗粒,可以预先在配方中加入少量TCO-PEG-Lipid,使张力烯烃暴露在颗粒水相界面。颗粒制备和纯化完成后,再加入Me-tetrazine-Cy5进行后标记。该路线把颗粒成形与染料连接分为两个独立阶段,可以减少Cy5对前期脂质组装过程产生的干扰。
如果Cy5部分带有磺酸基,则分子具有更高的极性和水相分散能力;如果没有磺酸化,较大的花青素芳香区域会增加一定疏水性。因此,不同厂家的Me-tetrazine-Cy5即使名称一致,也可能在水溶性、净电荷以及色谱行为方面存在明显差异。产品使用时应先确认是否为Sulfo或Disulfo结构。
Me-tetrazine-Cy5还可以作为多色体系中的远红色模块。例如某一组分使用FITC标记,另一组分利用Me-tetrazine-Cy5与TCO连接,即可通过不同光谱窗口分别观察。若同时使用Cy3、Cy5等多种花青素,应合理设置检测范围,并考虑光谱重叠对信号分析的影响。

产品名称:Me-tetrazine-Cy5
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
供应:西安瑞禧生物科技有限公司
关于我们:
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