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Fluorescein-DBCO(荧光素-二苯并环辛炔)是一种融合荧光示踪与点击反应活性的双功能试剂,CAS号为2054339-00-1,英文别名有FAM-DBCO、Fluorescein dibenzocyclooctyne,分子结构由荧光素(Fluorescein)发色团与二苯并环辛炔(DBCO)活性基团直接连接而成,无需额外间隔臂,兼具荧光成像与无铜点击反应双重功能,是点击化学与荧光检测交叉领域的重要试剂。
理化性质方面,Fluorescein-DBCO为橙黄色粉末,分子式为C34H23N3O6,分子量为561.56,纯度通常≥95%(HPLC检测)。该化合物继承了荧光素的优异光学特性,在水溶液中呈现明亮的绿色荧光,激发波长(Ex)约为495 nm,发射波长(Em)约为518 nm,荧光量子产率高,光稳定性良好,可耐受长时间光照而不易发生光漂白。溶解性方面,兼具疏水性与亲水性,易溶于DMF、DMSO等有机溶剂,在中性缓冲液中可部分溶解,可通过加入少量有机溶剂改善水溶性,避免在强酸性或强碱性环境中使用,防止荧光淬灭或DBCO基团活性下降。化学稳定性优异,DBCO基团不易发生自身聚合,荧光素发色团与DBCO基团的连接键稳定,储存时需置于-20℃避光、干燥环境,保质期约1年。
反应机制上,Fluorescein-DBCO的双重功能源于其独特的分子结构:一方面,DBCO基团作为无铜点击化学(SPAAC)的核心活性单元,具有较高的环应变能,可在无需金属催化剂、温和条件下(pH 7-9),与叠氮基(-N3)发生特异性环加成反应,形成稳定的三唑环,反应高效、快速且无副产物,可实现与叠氮标记分子的精准偶联;另一方面,荧光素发色团可发出稳定的绿色荧光,偶联后可通过荧光显微镜、荧光分光光度计等设备,实时追踪偶联产物的分布、含量及反应过程,实现“点击反应-荧光示踪”一体化。此外,该试剂无铜催化的特性,避免了金属离子对荧光信号的干扰,也适用于敏感体系的偶联与检测。
应用场景主要聚焦于点击化学荧光示踪、材料荧光修饰及探针分子构建。在点击化学荧光示踪中,可用于叠氮标记生物分子(如核酸、多肽)、材料的偶联与追踪,清晰观察偶联反应的进程、产物分布,为点击化学实验提供可视化支持;在材料荧光修饰中,可通过DBCO与材料表面的叠氮基团反应,将荧光素基团接枝到高分子材料、纳米载体、脂质体表面,赋予材料荧光识别与追踪功能,用于材料的转运、分布研究;在探针分子构建中,可作为荧光-点击双功能模块,与其他识别元件偶联,合成特异性荧光探针,用于环境中目标物质的检测、材料表面活性位点的定位等领域。此外,该试剂可用于体外实验与材料研究,不涉及临床治疗相关应用,确保内容方向合规。

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