产品名称：AF430 马来酰亚胺，AF430 Mal
化学结构与特性
分子结构：基于Alexa Fluor 430荧光染料（分子式如C₃₄H₄₅N₄F₃O₈S，分子量约726.8），通过马来酰亚胺基团（-maleimide）与巯基（-SH）特异性反应实现共价标记。马来酰亚胺环通过迈克尔加成与半胱氨酸残基的巯基形成稳定硫醚键，反应速率在pH 6.5-7.5下极快（巯基反应速率比氨基快约1000倍），确保高特异性。
光学性能：激发波长430-434 nm（蓝色/近紫外），发射波长539-540 nm（绿色），量子产率0.7-0.9，光稳定性良好（连续激发1小时后荧光保留率约75%），斯托克斯位移达105 nm，抗光漂白能力强，背景干扰低。
物理性质：亲水性磺化染料，含磺酸基团增强水溶性（PBS中溶解度120 μM），细胞毒性低（IC50 > 350 μM），pH耐受范围广（4-10），适合活细胞/活体实验。
生物应用场景
蛋白质标记与功能研究：
标记含巯基的蛋白质（如抗体、酶、细胞表面受体），用于免疫荧光、Western blot、流式细胞术（FACS）、活细胞成像（共聚焦/超分辨显微镜）及FRET技术，追踪蛋白质定位、动态变化及相互作用。
在蛋白质工程中，通过定点突变引入半胱氨酸，实现位点特异性标记，研究构象变化（如激酶活性、信号通路）。
细胞成像与检测：
标记细胞器（线粒体、内质网）、细胞膜蛋白及亚细胞结构，结合多色荧光（如AF594、FITC）实现共定位分析。
用于活细胞氧化应激监测（如谷胱甘肽标记）、药物递送追踪（纳米颗粒/抗体-药物偶联物）及细胞表面糖型分析。
生物传感器与检测：
与链霉亲和素偶联形成高亲和力探针（Kd≈10⁻¹⁵ M），用于生物素化抗原/抗体的检测（ELISA、免疫组化），信号放大效果显著（单个链霉亲和素可结合4个AF430染料）。
应用于流式细胞术、荧光共振能量转移（FRET）及生物传感器构建，实现高灵敏度、低背景的分子检测。
合成与储存
合成方法：通过AF430染料核心与马来酰亚胺丙酸的酰胺化反应制备，或经多步有机合成引入马来酰亚胺基团，需在无水无氧环境下进行，产物经HPLC纯化（纯度≥95%）。
储存条件：避光、干燥、-20℃保存，避免反复冻融；水溶液在4℃可稳定保存5天，需避免与强还原剂（如DTT）接触以防马来酰亚胺基团还原。


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